Laboratoriokäsikirja

M. tuberculosis-herkistyneet solut, gammainterferoni, erittävät solut, verestä

B -LyTbIFN (6174)

Lymfopeniapotilailla tämä tutkimus on suositeltavampi kuin tavallisempi 6173 B -TbIFNg tutkimus. Lymfopenisten näytteiden tutkimus on silti epävarmaa sen suhteen, saadaanko tutkimukseen tarpeeksi lymfosyyttejä. Tähän otetaan kantaa lausunnossa.

Indikaatiot

Mycobacterium tuberculosis -infektion/kontaktin osoitus. Mtb aiheuttamat kliiniset ja subkliiniset infektiot, erityisesti vaikeasti diagnosoitavat ekstrapulmonaaliset muodot (luustopesäkkeet, lymfadeniitti, sekä latentin tuberkuloosi-infektion diagnostiikka), ja varotoimena ennen infektioriskiä lisäävän hoidon aloitusta.  

B -LyTbIFN-tutkimuksen uutena indikaationa on atyyppisten mykobakteerien aiheuttama lasten kaulan alueen lymfadeniitti. Tutkimus sopii lapsille, jotka eivät ole saaneet BCG-rokotusta.

Näyte

Li-hepariiniputki 7/6 ml. HUOM! Putki otettava täyteen tai otettava myös rinnakkaisputki näytteen riittävyyden varmistamiseksi.
Aikuiset ja lapset yli 20 kg: 6 ml, lapset alle 20 kg: 4 ml.

Säilytys ja lähetys

Näytettä EI saa fuugata. Näytteen voi ottaa tiistain tutkimusta varten näytteen aikaisintaan maanantaina klo 07 ja torstain tutkimusta varten aikaisintaan keskiviikkona klo 07. Näytettä ei voida ottaa arkipyhää edeltävänä päivänä. Näytteen tulee saapua Vita laboratorioihin näytteenottopäivänä tai sitä seuraavana aamuna klo 10 mennessä.

Menetelmä

B -LyTbIFN on immunologinen tutkimusmenetelmä, jolla osoitetaan potilaan verestä M. tuberculosis antigeeneille herkistyneitä T-lymfosyyttejä. Eristettyjä mononukleaarisia valkosoluja stimuloidaan M. tuberculosis-bakteerille ominaisilla peptideillä 24 tuntia. Jos näytteessä on peptideille herkistyneitä efektori-T-lymfosyyttejä, ne aktivoituvat ja tuottavat interferoni gammaa (IFNg). Eritetty IFNg osoitetaan monoklonaalisilla vasta-aineilla, joista toinen on kiinnitetty mikrotitterilevyn membraaniin ja toinen, entsyymillä leimattu, reagoi substraatin kanssa muodostaen värillisiä täpliä (spotteja). Reaktiivisten solujen määrä lasketaan.

Toimitusaika

1-2 työpäivää

Tulkinta

Positiivinen (reaktiivinen) : >55 spot/E6 lymfos.
Raja-arvoinen: 25-55 spot/E6 lymfos.
Negatiivinen (nonreaktiivinen): <25 spot/E6 lymfos.

Tulokset ilmoitetaan reaktiivisten lymfosyyttien määränä /E6 veren lymfosyyttiä, kullekin 3 antigeenille erikseen. Antigeeni A on ESAT-6 -peptidiseos, antigeeni B on CFP-10 - peptidiseos ja kontrolliantigeeni on PPD (M. tuberculosis "Purified Protein Derivative" -proteiiniseos, jonka antigeenien pääosa on läsnä myös BCG-rokotekannalla). Lisäksi soluja stimuloidaan kontrollimitogeenilla (PHA). Positiivinen PPD-tulos voi seurata M. tuberculosis- kontaktista, BCG-rokotuksesta tai atyyppisen mykobakteerin aiheuttamasta infektiosta.

Vaikeassa tuberkuloosissa tai muussa immunosupressiotilassa spesifisten peptidiantigeenien antama tulos voi jäädä negatiiviseksi. Harvinaiset M. marinum, M. kansasii ja M. szulgai -infektiot voivat myös antaa positiivisen tuloksen spesifisillä peptideillä. Tulokseen liittyy lausunto.

Kommentti

Tutkimuksessa tarvitaan eläviä lymfosyyttejä. Lämpötilan noustessa tai alittaessa huonelämpötilan näytteiden kelpoisuus tutkimukseen heikkenee merkittävästi. Tästä syystä näyte on aina säilytettävä ja kuljetettava huoneenlämpöisenä (18-28°C).

Tekopaikka

HUSLAB

Konsultointi

Mikrobiologi, Taru Meri 
Puh. 044 0185731
taru.meri@vita.fi